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Quindi il substrato migliore di nutrizione è il sangue, tanto di uomo, quanto di 
coniglio, defibrinato o no. 
Nei substrati artificiali di nutrizione, la coltura del germe in parola si sviluppa 
abbastanza rigogliosamente e si mantiene nei trapianti successivi, solo quando si 
faccia in questi substrati un innesto molto abbondante da coltura in sangue, o quando 
sì aggiunga ad essi una piccola quantità di sangue sterile. 
a) Sangue. — Le colture in sangue sono sempre molto ricche; sono costituite 
da elementi separati in forma di diplococchi, simili ai diplococchi del Frinkel, e da 
catene formate dagli stessi elementi, e tanto isolate quanto riunite in ammassi; tali 
colture raggiungono il massimo del loro sviluppo in 24-48. 
Il sangue perde presto il colore rosso-rutilante ed acquista un colore più scuro, 
rosso-bruno, assumendo in ultimo tutto l'aspetto del siroppo di more. Il sangue non 
defibrinato, poi, sembra essere un substrato nutritivo migliore di quello defibrinato 
e la coltura vi si conserva più a lungo. 
5) Brodo. — Nel brodo con aggiunta di sangue o con innesti fatti diretta- 
mente dal sangue, la coltura si sviluppa assai presto ed è abbastanza ricca; dopo 24? si 
avverte nel brodo un intorbidamento uniforme con qualche fiocchetto sospeso; dopo 36- 
48% la coltura è interamente rischiarata ed al fondo si è depositato un ricco sedimento 
fatto da grossi fiocchi che, agitando il tubo, si sollevano facilmente mescolandosi di nuovo 
al liquido sovrastante. Il brodo per lo sviluppo della coltura diviene prontamente e 
manifestamente acido. Nei trapianti successivi, senza aggiunta di sangue, la coltura 
sì fa sempre più scarsa, fino che al 2°-3° passaggio rimane completamente sterile. 
c) Agar. — La coltura nasce solo quando all’agar si aggiunge del sangue d'uomo 
o di coniglio (blut-agar), o quando l'innesto è fatto direttamente da coltura in sangue, 
ed in 24* raggiunge il massimo del suo sviluppo. L'aspetto della coltura è molto 
delicato; essa è costituita da colonie staccate piccolissime, di colore bianco-grigiastro, 
talora così vicine fra loro da formare come un sottilissimo velamento finamente pun- 
teggiato, quasi pulverulento, non sempre rilevabile facilmente ad occhio nudo a causa 
della sua sottigliezza e trasparenza. 
A luce incidente si vede che le colone appariscono rilevate, trasparenti, come 
piccole gocciolette, a superficie lucida, secca. Nell'agar glicerinato la coltura è più 
ricca, le colonie più confluenti, ed il loro aspetto è più umido, meno secco di quello 
delle colonie sviluppate sull’agar senza glicerina. 
I trapianti da blut-agar in agar senza aggiunta di sangue, dapprima nascono 
molto scarsamente, dando luogo allo sviluppo di 8-4 colonie appena, poi nei succes- 
sivi trapianti non nascono più affatto. È sembrato osservare, peraltro, che la col- 
tura del germe in questione, nasce tanto meglio sull’agar semplice senza aggiunta 
di sangue quanto più il germe stesso è attenuato, cioè quando non è più capace di 
uccidere il topolino ed il topo decumano; nel qual caso la forma microscopica ha 
perduto quasi intieramente il carattere di streptobacillo che aveva in origine, per 
assumere maggiormente l'aspetto di un ordinario streptococco. 
d) Gelatina. — Anche in questo mezzo di nutrizione, con o senza aggiunta 
di zucchero, la coltura nasce presto e bene, e tanto a 37° quanto a 22° C., se alla 
gelatina sì aggiunge un po’ di sangue o se l'innesto viene fatto da coltura in sangue. 
