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Cultura in agar a piatto. — Le colonie profonde sono generalmente ovali con 
angoli molto acuti di colorito verdognolo. Le superficiali sono aniste, rotonde, con un 
orlo, che qua e là presenta irregolarmente delle piccole insenature emisferiche di un 
colorito verdognolo, che va degradando d' intensità dal centro alla periferia, dove diven- 
tano quasi incolori. Molto interessante è lo sviluppo delle colonie che sono prossime 
alla superficie, sviluppo che si può seguire in tutte le sue fasi. 
La colonia, dapprima ovale, tende, generalmente da una sola parte, ad aprirsi 
come un libro e dalla fenditura incomincia a svilupparsi un alone di una sostanza 
chiara, finamente granulosa, che si diffonde sempre di più involgendo la colonia pri- 
mitiva, che mano mano diminuisce fino a scomparire. 
Nella piastra oltre alle colonie, che sono ab origine superficiali e quelle, che si 
mantengono sempre profonde ossia ovali, si osservano tutte queste forme di passaggio. 
Da ognuna di queste forme, ripetendo le piastre, si ottiene la medesima serie di forme. 
Le piastre hanno un colore verdognolo meno intenso di quelle in gelatina. 
Culture per strisciamento in agar. — Sviluppa lungo il percorso dell'ago in 
forma di una striscia verdognola, che si estende poco. L'orlo è mammellonato. Tutta 
la piastra è verde. 
Cultura in brodo. — Intorbida uniformemente il brodo di Loeffler. Presto si 
forma una pellicola superficiale e un deposito al fondo. Il brodo diventa verde. Molto 
più rapido e intenso è lo sviluppo in brodo nitrato al 0,30 °/. Qui invece della pel- 
licola si forma dopo 1-2 giorni una schiuma di finissime bolle, cne poi divengono più 
grosse e più rade fino a scomparire dopo circa una settimana. Notevole è il fenomeno 
da noi costantemente notato, che, dopo un giorno dall’ innesto, quando alla superficie 
del liquido si notano poche bollicine, se si scuote con un colpo secco il tubicino, 
dopo qualche secondo si ha uno sviluppo considerevole di finissime bolle, che si sol- 
levano dal fondo e si raccolgono alla superficie formando un mezzo centimetro di 
schiuma. 
Cultura su patate. — Si sviluppano rapidamente formando una patina color 
rosso-Vivo. i 
Isolamento del B. denitrificans VI. 
Fin dal 1877 il Bechamp (') aveva notato che se si lascia esposta all'aria una 
soluzione di nitrato, acetato e fosfato di soda, si ha una viva fermentazione con svi- 
luppo di azoto. Il Bechamp non ha cercato di isolare l'agente di questa fermentazione. 
Abbiamo ripetuto queste esperienze, esponendo in un canto del laboratorio all'aria una 
soluzione all'uno °/, di questi tre sali. Dopo tre giorni la soluzione si è fortemente 
intorbidata ed abbiamo notato lo sviluppo di bollicine gassose. Un innesto in un tubi- 
cino di brodo nitrato, presentò una schiuma notevole. Dopo una serie di passaggi in 
brodo nitrato, procedemmo all’ isolamento di questo denitrificatore mediante piastre in 
gelatina. Potemmo così ottenere in cultura pura un microrganismo con i seguenti 
(') I. Ber. Thier. Chemie, 1877. 
