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A questo punto si prese una cultura del V in brodo nitrato, in cui la fermen- 
tazione era finita, se ne arroventò l'orlo superiore e si sostituì alla provetta unita al 
tubo dell’ apparecchio, di cui la punta affilata venne così a pescare nel brodo della 
cultura. 
Aprendo la pinza con precauzione si fecero entrare alcune goccie del brodo nel pallon- 
cino e per meglio assicurare il vuoto questo venne capovolto in un bagno di glicerina. 
Questo apparecchio ci parve rispondere a tutte le esigenze chimiche e batterio- 
logiche più rigorose. Servendoci dell’ebollizione, non solo veniva scacciata tutta l’aria, 
ma anche tutti i gas in soluzione. L'apparecchio prima dell’ innesto riceveva un'ultima 
sterilizzazione ed un ultimo lavaggio col suo stesso vapor d'acqua, e rimaneva montato 
nella maniera più adatta per il processo analitico per cui doveva servire. Di più, ser- 
vendoci del vuoto come mezzo d'aspirazione per l’ innesto, si risolveva il difficile pro- 
blema di fare una cultura anerobica (la più adatta per la denitrificazione) senza esporsi 
ai serî pericoli dell’ inquinamento che presenta il rimuovere i tappi dai palloni al 
momento dell’ innesto. 
I metodi precedentemente usati non rispondevano a queste esigenze, quando si 
rifletta che Burri e Stutzer non toglievano l’aria, limitandosi a calcolarla dalla quan- 
tità d'ossigeno assorbito dal pirogallato potassico, che col metodo di uno di noi insieme 
al dott. Garino non si può raccogliere che una parte del gas, e che coi metodi di 
Deherain ogni precauzione batteriologica è bandita. 
Dopo tre giorni il liquido dell'apparecchio cominciò a farsi torbido, fine bollicine 
si sollevavano dal fondo e si raccoglievano alla superficie in forma di spuma. Questo 
fenomeno durò dieci giorni. Alcuni giorni dopo scomparsa la spuma, ritenendo finita 
la denitrificazione, procedemmo all'analisi dei prodotti della fermentazione. 
ANALISI DEL GAS ESTRATTO ALLA POMPA SPRENGHEL. 
Il gas sviluppato dalla fermentazione è stato raccolto alla pompa. Il mercurio è 
stato purificato coll’ebollizione con acido cloridrico, e similmente la pompa è stata 
lavata con acido cloridrico e poi con acqua distillata. 
In un gassometrino Bunsen si sono così raccolti cc. 106 di gas alla temperatura 
di 23° ed alla pressione di mm. 767,3. Questa pressione per la correzione barome- 
trica scende a mm. 764,43 e per la correzione dovuta alla tensione del vapor d’acqua 
diventa 743,5. 
Ora applicando la formola 
AH 278, 
V =V'7G0T 
si ha che il volume del gas, corretto, equivale a cc. 95,64. 
Per l’analisi del gas fu seguito il metodo di Hempel. Dopo travaso nella pipetta 
a potassa i cc. 106 divennero cc. 66,1 alla T 23° e alla Ho 767,3 mm. che ridotti 
col solito metodo equivalgono a cc. 59,64. 
Lasciato l'apparecchio col vuoto attaccato alla pompa, l'indomani si estrassero 
altri cc. 2,5 di gas a T:23° e H. 766 mm. dei quali cc. 0,5 furono assorbiti dalla 
potassa. 
