020 
S'incominciò col fondere il nitrato di potassio perchè nonostante ripetute cristal- 
lizzazioni presentava sempre traccie di ammoniaca con il liquido di Nesslér. 
Una soluzione di gr. 2,50 di nitrato fuso, glucosio e. sali, dopo sterilizzazione 
fu innestato col 2. denitrificans V. La soluzione era in un palloncino chiuso da un 
tappo di gomma attraversato da un tubo di vetro che entrando a smeriglio in una 
î ; 3 . N 
boccetta di lavaggio pescava in cc. 3 di H,S0, 10: 
questa soluzione, la boccetta era connessa con un'altra boccia con H,S0,. 
Dopo due giorni, quando il liquido era già intorbidato e si notarono delle bolle 
Per proteggere poi il titolo di 
di gas, si rititolarono i ce. 3 di H, SO S contenuti nella boccetta di lavaggio con 
KOnI e sì ricercò l’ NH; nel liquido in fermentazione col metodo di Schloesing. 
Tutte e due queste prove esclusero la presenza di traccie di ammoniaca tanto nel gas 
prodotto che nel liquido in via di fermentazione. 
Si scelse per l’esperienza il momento iniziale della denitrificazione come quello 
in cui dovevano abbondare i prodotti intermedî della denitrificazione. 
Ad escludere poi in via sperimentale l’idea che il batterio in esame potesse 
dall'’NH; formare azoto gas, abbiamo sostituito nel solito mezzo di cultura (glucosio, 
cloruro, fosfato e nitrato) il (NH,) NO; al KNO;. 
Come nella scissione della molecola del KNO; si ritrova nel liquido fermentato 
tutta la KOH corrispondente al nitrato, così adoperando (NH,)NO; tutta l’ NH; si 
dovrebbe trovare nel liquido. Ora se i batterî fossero in grado di sviluppare azoto 
dall’ NH3, avrebbe dovuto trovare in soluzione una quantità di NH3 minore di quella 
contenuta nel (NH) NO; impiegato; chè se poi d'altra parte l' NH; trovata fosse stata 
superiore a quella calcolata, si verrebbe a dimostrare la proprietà del nostro batterio 
di ridurre il radicale NO; in NH,. 
Si fecero adunque tre palloncini contenenti quantità aliquote del mezzo di cul- 
tura sopradetto. Uno fu innestato e gli altri due lasciati come controllo. 
Dopo alcuni giorni si fecero in tutti e tre i palloncini determinazioni di NH3 
col metodo di Sehloesing e fu trovata in tutti e tre la stessa quantità di DIES che 
vi si era messa sotto forma di (NH,)NO;. 
Pur non escludendo adunque che simbiosi batteriche possano compiere il feno- 
meno della denitrificazione con la formazione di (NH,) NO;, ed ammettendo anzi che 
la notevole quantità di N,0 trovata dal Deherain nel gas sviluppato dalle sue cul- 
ture sia un forte appoggio all'ipotesi da noi messa avanti, per cui alcune specie di 
denitrificatori ridurrebbero i nitrati ad azoto libero gradualmente trasformandoli cioè 
prima in nitriti e poi in iponitriti di cui l’ N30 sarebbe l'indice, dobbiamo però di- 
chiarare che queste due ipotesi non possono essere applicate al processo della ridu- 
zione dei nitrati operata dal B. denstrificans Vi. 
