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trasmissibilità della malattia da uno all’altro animale bastavano già a provare indubbia- 
mente che si ha a che fare con una vera infezione e non si tratta di intossicazione. Ma 
per meglio avvalorare siffatto concetto, ho fatto osservazioni durante la vita sul sangue 
dei topolini inocolati sottocute; e queste mi hanno dimostrato che, già molte ore prima 
della morte. le colture rivelano nel sangue circolante la presenza dei microrganismi, 
i quali si rivelano anche al semplice esame microscopico, qualche ora (12) prima della 
morte. 
Esperienza. — In due topolini, inoculati col sangue infetto di 4° passaggio di coltura del 
proteo nella gelatina, comincio ad esaminare il sangue 12 ore dopo fatto l’innesto, escidendo un 
pezzetto d’orecchio, previamente sterilizzato, e facendo esami microscopici e colture del sangue fuo- 
ruscente. Ripeto l’esame di due in due ore, fino a poco tempo prima della morte. Le colture rima- 
sero sterili fino a quelle fatte 20 ore dopo l'innesto. Quelle fatte alla 22% ora ed in seguito mostra- 
rono tutte sviluppo abbondante di proteo. L'osservazione microscopica rimase negativa, invece, fino 
alla 28° ora. 
I topi morirono 40 ore circa dopo l'innesto. 
Nel sangue circolante, adunque, 18 ore prima della morte le colture rivelarono la presenza del 
proteo, il quale 12 ore prima vi era così abbondante, da rivelarsi pure nei preparati microscopici. 
Veniva posto così fuor d’ogni dubbio il fatto della moltiplicazione del proteo nell’organismo 
animale vivente. 
Nei topi ho sperimentato pure l'azione dei prodotti dello scambio materiale del 
proteo, contenuti nelle colture rese sterili col calore, oppure colla filtrazione attraverso 
il filtro di porcellana. 
Per evitare la possibilità, che il calore distruggesse alcuni di quei prodotti 0 
che ne trattenesse il filtro nei suoi pori, insieme coi microrganismi, ho fatto tentativi 
numerosi per separare meccanicamente i protei dal liquido di coltura, mediante la 
forza centrifuga. Un tal mezzo, che non so che sia stato finora provato da altri per 
questo scopo, pareami dovesse corrispondere, sia perchè si trattava di microrganismi 
privi di mobilità, sia perchè, essendo piuttosto grossi e quindi pesanti, potevano 
facilmente con quel mezzo separarsi dal liquido in cui erano sospesi. 
Ho tentato la prova, mettendo le colture in brodo e le diluzioni acquose delle 
colture nella gelatina entro lunghi tubi d'assaggio, che tenevo per un tempo varia- 
bile nell'apparecchio centrifugatore. 
Ho fatto agire la forza centrifuga per. 2-8, fino a 24-48 ore, ottenendo la 
separazione del liquido in due strati distinti, uno inferiore denso ed opaco ed un 
altro superiore, quasi trasparente. 
L'esame microscopico, però, mi ha rivelato che anche nei tubi centrifugati per due 
giorni di seguito lo scopo non si raggiunge che parzialmente, giacchè nel liquido 
soprastante si contiene ancora qualche raro esemplare di proteo e l'innesto di una 
piccola quantità di esso nei topolini li uccide, coll’infezione caratteristica. 
Rinunziai allora a tal mezzo, per attenermi alla sterilizzazione col calore e col 
filtro. L'esposizione per un'ora alla temperetura di 60° C., la filtrazione attraverso le 
candele Chamberland, a modica pressione, offrono un liquido, perfettamente sterile 
e dotato egualmente di un'azione tossica discreta per i piccoli topi, come lo provano 
le seguenti esperienze. 
Esperienze. — In due topolini inoculo dapprima sottocute 2-3 anse di platino di coltura di 
proteo sterilizzata col calore, ed inoculo in pari tempo in due altri topi una sola ansa di platino 
