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Estratti dall'alcool, asciugati tra due strati di carta bibula e poi esposti all'aria 
fino a evaporazione completa dell'alcool, i preparati sono pronti per la colorazione del 
Romanowsky; colorazione che è vantaggioso eseguire nei primi giorni dopo la fissazione. 
Delle varie modalità suggerite, due mi hanno dato i migliori risultati: il noto 
procedimento con la soluzione del Giemsa; quello preconizzato dal Laveran, all'eosina 
e bleu di metilene all'ossido d'argento (). 
Per il primo ho trovato utile collocare in ampie piatte di vetro i vetrini, con 
il materiale rivolto in alto; su di essi si versa la miscela colorante, in quantità ap- 
pena sufficiente per ricoprirli. Per riguardo a quest'ultima, sebbene l'aggiunta di una 
goccia di soluzione del Giemsa per ogni centimetro cubico di acqua distillata sia 
sufficiente, tuttavia mi sembra più vantaggioso che la proporzione della soluzione 
madre sia alquanto maggiore, ad es. 40-42 goccie su 35 cme. di acqua distillata. 
La miscela prima di essere versata sui preparati deve venire fortemente riscal- 
data: è opportuno inoltre rinnovarla ogni 10-15 minuti. 
Dopo 40-50 minuti, un'ora al più, il massimo di colorazione è raggiunto. Si la- 
vano i preparati sotto forte getto d'acqua, si asciugano con cura con la carta bibula, 
si lasciano essiccare all'aria e si montano in balsamo. 
Per il procedimento con la miscela al bleu Borrel io mi sono pure servito di piatte. 
Preparata in queste la soluzione colorante, vi si immergono i preparati. La superficie 
che porta il materiale, rivolta in basso, non deve toccare il piano del recipiente, ciò 
che si ottiene tenendo sollevato il vetrino ad un'estremità per mezzo di una listerella 
di vetro. Dopo 40-50 minuti, senza rinnovare il colore, anche dopo un tempo più 
breve, la colorazione del parassita è avvenuta. Si lava sotto forte getto d’acqua, si 
differenzia con la soluzione di tannino al 5°/ per qualche minuto; si lava di 
nuovo, prima sotto getto d’acqua, poi in acqua distillata; asciugamento con carta 
bibula ecc. 
Come si vede, la tecnica della colorazione (per la quale, si comprende, la pu- 
lizia scrupolosa dei recipienti è condizione indispensabile) ben poco si scosta dai pre- 
cetti classici. Non sempre però, ripeto, dà risultati ugualmente soddisfacenti. 
La riuscita è subordinata ad un complesso di fattori, molti dei quali non saprei 
indicare con sicurezza, così che, anche attenendosi sempre alle identiche norme, mentre 
in un animale quasi tutti i parassiti sono ben colorati, nei preparati di altro animale 
la differenziazione fine non è avvenuta. Ne viene il suggerimento, per chi volesse ese- 
guire ricerche di controllo, di estenderle a materiali di provenienza diversa, e so- 
vratutto di cominciare su quelli più adatti: sui grossi parassiti in ispecial modo dei 
bovini infettati sperimentalmente di rabbia di strada e morti dell'evoluzione naturale 
della malattia. 
Ricorderò infine che la miscela del Giemsa, che pure dà talvolta delle immagini 
di grande chiarezza, mi si è mostrata alquanto inferiore — per riguardo alla costanza 
dei risultati e più particolarmente perla differenziazione degli stadî ultimi più fini del 
microrganismo — alla miscela di eosina e di bleu Borrel. Da questa circostanza deduco 
(1) Il metodo è riportato e descritto nei particolari in « Laveran e Mesnil: Trypanosomes et 
Trypanosomiases », Masson, Paris, 1904, pagg. 10-11. 
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