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per parecchie ore (in generale, 2 ore), si lavano replicatamente con alcool a 70° 
e ad 80°, finchè nel liquido non si vede più il colore del reattivo; e si conservano 
da ultimo in alcool a 90°. Con la reiterata lavatura alcoolica, i pezzi trattati col 
liquido del Kleinenberg si scolorano completamente; degli altri reattivi resta sem- 
pre negli elementi qualche traccia più o meno debole. 
Se si lavora subito il materiale così trattato e conservato, gli elementi si tro- 
vano e durano inalterati per un certo tempo; ma alla fine si macerano più o 
meno tardi, secondo la specie. Nelle Salpe che hanno consistenza gelatinosa, gli ele- 
menti non tardano ad andare in rovina: laddove in quelle a consistenza coriacea 
o cartilaginea gli elementi si conservano integri per lungo tempo; ed il corpo man- 
tiene la forma, anche quando vien trattato col liquido del Kleinenberg. In una ea- 
tena di S. zonaria, che mi fu inviata, da Messina, dallo stesso prof. Kleinenberg, e 
da lui trattata col suo liquido e conservata in alcool a 90°, dopo tre anni ho tro- 
vato gli elementi degli embrioni, integri come allo stato fresco. 
La colorazione, poichè ha grande importanza nella ricerca, deve variare se- 
condo lo scopo. Per lo studio delle sezioni fatte su pezzi trattati col liquido del 
Kleinenberg, i migliori mezzi coloranti sono: il carminio alcoolico del Mayer, .il 
carminio litico dell’Orth ed anche, ma non così eccellente per la nettezza come 
questi due, il carminio borico del Grenacher. 
Coloriti intensamente gli embrioni con .una di tali sostanze, secondo il processo 
conosciuto; disidratati con l’alcool assoluto, rischiarati col celoroformio, inclusi in 
paraffina, fatti i tagli col microtomo del Jung, e disposte le sezioni in serie sul 
porta-oggetti, secondo il metodo del Giesbrecht; li ho chiusi, ora nel balsamo del 
Canada sciolto con xylol, ed ora in un miscuglio a parti uguali di benzina, tremen- 
tina e gomma dammar, indicato dal Flemming. 
Per studiare a trasparenza l’animale intero o qualche pezzo staccato, mi 
sono riusciti abbastanza bene gli embrioni trattati con l’acido cromico, conservati in 
alcool, rischiarati e montati in glicerina, dopo averli coloriti un poco mediante il 
picrocarminio ed anco senza colorazione alcuna. Ho avuto anche migliori risultati, 
quando li ho coloriti, per pochi minuti, col carminio acetico dello Schneider, e li ho 
posti in glicerina finchè non erasi tolta la parte non fissata del carminio; e quindi, 
disidratati coll’aleool assoluto e rischiarati con olio di garofano, li ho chiusi in bal- 
samo. I pezzi trattati coll’ acido osmico, li ho scolorati prima per mezzo di una 
corrente di cloro, nel modo indicato da P. Mayer. Per la ricerca dei nervi, l’acido 
osmico serve contemporaneamente come mezzo colorante. 
Per istudiare la struttura, la maturazione, e la fecondazione dell’ovo mi son 
valso, con buon esito, del seguente processo: I pezzi contenenti l’ovario delle Salpe 
trattate con la soluzione di acido cromico (acido cromico !/» %/), 0 di acido cro- 
mico ed acido acetico (‘/5 di una soluzione d’acido cromico all’ 1%/s, e 1/5 d’acido 
acetico concentrato), 0 d’acido cromico ed acido osmico (acido cromico 1.°%/, con al- 
cune gocce d’acido osmico 1 %/g), 0 col liquido del Kleinenberg, e conservati in alcool, 
li ho coloriti, ora immergendoli, per pochi minuti, nel carminio acetico dello Schnei- 
der, ora mettendoli in ematossilina. Dopo, disidratatili con alcool assoluto, alcuni, 
preventivamente rischiarati con olio di garofano, li ho chiusi in balsamo del Canadà, 
